คำจำกัดความของ Totipotency: การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ประโยชน์ ตัวอย่าง
คำนิยาม Totipotent
Totipotent ในชีววิทยาของเซลล์แสดงให้เห็นถึงความสามารถของเซลล์ที่จะสามารถสืบพันธุ์ได้ในทุกความเป็นไปได้ (ทั้งหมด) ในการพัฒนาที่เป็นไปได้ คำคุณศัพท์
totipotent ใช้มากขึ้น เซลล์ต้นกำเนิดรวมทั้งไซโกตมีความสามารถนี้ ในพืช เซลล์เนื้อเยื่อที่จุดเจริญเติบโตก็มีความสามารถนี้เช่นกันเซลล์ Totipotent มีศักยภาพทั้งหมด พวกเขาสามารถเป็นผู้เชี่ยวชาญด้านเซลล์ที่มีพหุศักยภาพที่สามารถ
เซลล์ลูกสาวจำนวนมาก แต่ไม่ใช่ทั้งหมด จำเป็นสำหรับการพัฒนาของสิ่งมีชีวิต เซลล์ Pluripotent ได้รับความเชี่ยวชาญพิเศษมากขึ้นในเซลล์หลายศักยภาพที่พัฒนาเป็นเซลล์ที่มีหน้าที่เฉพาะ ตัวอย่างเช่น เซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดหลายชนิดกลายเป็นเซลล์เม็ดเลือดแดง เซลล์สีขาว และเซลล์เม็ดเลือดในเกล็ดเลือด (เกล็ดเลือด)
ความสามารถของ totipotency สามารถเปลี่ยนแปลงได้โดยการเปลี่ยนสภาพแวดล้อมการดำรงชีวิต/การเจริญเติบโตของเซลล์ การเปลี่ยนแปลงของออสโมติก สารอาหาร ฮอร์โมน หรือแหล่งพลังงานที่สัมผัสกับเซลล์สามารถเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติเหล่านี้ได้ เป็น pluripotent (“หลายศักยภาพ”), multipotent (“หลายศักยภาพ”) หรือ unipotent (“ศักยภาพเดียว”) เซลล์ Pluripotent มีความสามารถในการเปลี่ยนแปลงจำนวนมาก multipotent เพียงไม่กี่และ Unipotent คือรูปแบบเซลล์ที่ระบุไว้
ทฤษฎีอำนาจอธิปไตย
ทฤษฎีศักยภาพสูงสุดคือความสามารถของเซลล์พืชแต่ละเซลล์ที่จะกลายเป็นบุคคลที่สมบูรณ์แบบเมื่ออยู่ในสภาพแวดล้อมที่เหมาะสม ทฤษฎี totipotency ถูกเสนอโดย ก. ฮีเบอร์แลนด์ ในปี พ.ศ 1898. ในปี พ.ศ 1950, เอฟซี สจ๊วต และนักศึกษาของเขาจากมหาวิทยาลัยคอร์เนลล์ได้พืชแครอททั้งหมดจากเซลล์โซมาติกของเซลล์โฟลเอมรากแครอท ขั้นตอนในศักยภาพสูงสุดของเซลล์แครอทในการสร้างบุคคลใหม่มีดังนี้: แครอทราก phloem – หั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ อย่างละ 2 มก. – ปลูกใน สารอาหาร – การแบ่งเซลล์, แคลลัส (เนื้อเยื่อไม่แตกต่างกัน) เกิดขึ้น – แคลลัสถูกแยกออกจากสารอาหาร – แคลลัสแบ่งออกเป็นตัวอ่อน – พืชเกิดขึ้น ใหม่.
การปลูกพืชแบ่งออกเป็น 2 ประเภท คือ แบบสมัยใหม่ เช่น การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ และในวิธีดั้งเดิม เช่น การต่อยอด การตัด การติด (การตอนกิ่ง) การมุด และการตอนกิ่ง/การครอบฟัน
ขึ้นอยู่กับธรรมชาติของ totipotency ส่วนหนึ่งของพืชสามารถโคลนเป็นพืชที่เหมือนกันทางพันธุกรรม ความพยายามที่จะได้บุคคลใหม่จากเซลล์หรือเนื้อเยื่อเดียวเรียกว่าการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
การมีอยู่ของ totipotency ในเนื้อเยื่อพืชถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้เครื่องไถพรวนที่สม่ำเสมอในปริมาณมากและ เซลล์พืชสามารถเป็น totipotent (เต็มศักยภาพ) นั่นคือสามารถรักษาได้ ความแรง ตัวอ่อน เพื่อสร้างทุกส่วนของสิ่งมีชีวิตที่โตเต็มที่
ทฤษฎี totipotency ถูกเสนอโดย ก. ฮีเบอร์แลนด์ ในปี พ.ศ. 2441 ในปี พ.ศ. 2493 เอฟซี สจ๊วต และนักเรียนของเขาได้ต้นแครอททั้งต้นจากเซลล์โซมาติกของเซลล์โฟลเอมรากของแครอท
ขั้นตอนในการ totipotency ของเซลล์แครอทเพื่อสร้างบุคคลใหม่มีดังนี้:
- แครอทรากฝอย
- หั่นเป็นชิ้นเล็กๆ อย่างละ 2 มก.
- ปลูกด้วยสารอาหาร
- เซลล์แบ่งตัว แคลลัสเกิดขึ้น (เนื้อเยื่อไม่แตกต่างกัน)
- แคลลัสแยกตัวในสารอาหาร
- แคลลัสแบ่งตัวเป็นเอ็มบริโอ
- ก่อตั้งโรงงานใหม่
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: การทำความเข้าใจ Keratinocytes ในชีววิทยา
ศักยภาพของเซลล์
ทุกเซลล์ในพืชมีข้อมูลทางพันธุกรรมเหมือนกัน
เซลล์นี้มีความสามารถในการเติบโตเป็นบุคคลใหม่ทั้งหมดเหมือนพ่อแม่ เพราะสามารถดำเนินกิจกรรมการเผาผลาญทั้งหมดและ แสดงข้อมูลทางพันธุกรรมทั้งหมดภายใต้เงื่อนไขที่ตรงตามข้อกำหนดเพื่อสร้างสิ่งมีชีวิตที่สมบูรณ์และแตกต่าง เต็ม. ศักย์ของเซลล์นี้เรียกว่า totipotent หรือ เต็มศักยภาพ.
ด้วยศักยภาพสูงสุด สามารถโคลนพืชหนึ่งต้นให้เป็นพืชที่เหมือนกันหลายต้นได้ ความสามารถของเซลล์เหล่านี้ทำให้นักวิทยาศาสตร์สนใจที่จะพัฒนาเซลล์หรือเนื้อเยื่อเหล่านี้ให้กลายเป็นบุคคลใหม่ ความพยายามในการรับบุคคลใหม่จากเซลล์หรือเนื้อเยื่อเดียวเรียกว่า วิธีการแยกเนื้อเยื่อพืช.
หลักการพื้นฐานของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเหมือนกับการปักชำ ร่างกายพืชแต่ละชิ้นจะกลายเป็นบุคคลใหม่ทั้งหมด (micropropagation) หากสภาพแวดล้อมเหมาะสมและมีสารอาหารเพียงพอ แต่ละส่วนของร่างกายของพืชจะสามารถเติบโตเป็นบุคคลจำนวนหนึ่งที่มีลักษณะเหมือนกับพ่อแม่ได้
พืชมีฮอร์โมนภายในที่สามารถกระตุ้นการเจริญเติบโตได้ เช่น ออกซินและไซโตไคนิน ฮอร์โมนนี้จะกระตุ้นการแบ่งเซลล์พืชเพื่อให้เกิดการเจริญเติบโต โดยการเพิ่มฮอร์โมนการเจริญเติบโต (ออกซิน) ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ เซลล์หรือเนื้อเยื่อเหล่านี้จะแบ่งตัวเพื่อสร้างมวลของเซลล์แคลลัสที่ไม่แตกต่างกัน
ความแตกต่างคือจุดเริ่มต้นของกระบวนการสร้างอวัยวะซึ่งมีลักษณะเฉพาะโดยผลของการแบ่งเซลล์ที่มีรูปแบบที่แตกต่างกันไปสู่การก่อตัวของอวัยวะบางอย่าง จากนั้นเซลล์แคลลัสจะเติบโตเป็นบุคคลใหม่
ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ขั้นตอนของการพัฒนาเซลล์โซมาติกเป็นตัวอ่อนจะเหมือนกับขั้นตอนของไซโกต ความแตกต่างคือไซโกต (2n) เกิดจากการแต่งงานของสเปิร์มเดี่ยวและไข่ การเจริญเติบโตของเอ็มบริโอนี้เริ่มจากเซลล์ → ทรงกลม → รูปหัวใจ → รูปร่างตอร์ปิโด → รูปใบเลี้ยง → ต้นอ่อน
ผลการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชเรียกว่าโคลน โรงงานแห่งใหม่นี้สามารถพัฒนาได้ในดินธรรมดาหรือบนพืชไร้ดิน ด้วยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชจะมีการผลิตจำนวนมากโดยไม่มีพื้นที่ขนาดใหญ่ที่มีคุณภาพกับผู้ปกครองเพื่อตอบสนองความต้องการด้านอาหารของชุมชน
เซลล์ประเภทต่าง ๆ ถ่ายทอดยีนชุดต่าง ๆ ความแตกต่างระหว่างเซลล์ประเภทต่างๆ ขึ้นอยู่กับโปรตีนหลักที่ผลิตขึ้น ซึ่งพิจารณาจากระดับการควบคุมการสังเคราะห์โปรตีน มีห้าตัวควบคุมในการก่อตัวของโปรตีนจาก DNA:
- การควบคุมการถอดเสียงจะควบคุมวิธีการและเวลาที่ยีนถูกถอดความ
- การควบคุมการประมวลผล ควบคุมวิธีการประมวลผลการถอดเสียง RNA
- การควบคุมการขนส่ง เลือกว่า m-RNA ใดในนิวเคลียสของเซลล์จะถูกปล่อยสู่ไซโตพลาสซึม
- การควบคุมการแปล การเลือก m-RNA ในไซโตพลาสซึมซึ่งแปลโดยไรโบโซม
- ควบคุมการเสื่อมสภาพของ m-RNA ทำให้ m-RNA บางชนิดมีเสถียรภาพในไซโตพลาสซึม
Totipotency
ขึ้นอยู่กับธรรมชาติของ totipotency ส่วนหนึ่งของพืชสามารถโคลนเป็นพืชที่เหมือนกันทางพันธุกรรม ความพยายามที่จะรับบุคคลใหม่จากเซลล์หรือเนื้อเยื่อเรียกว่า is การเพาะเลี้ยงเซลล์ หรือ วิธีการแยกเนื้อเยื่อพืช. หลักการเพาะเลี้ยงเซลล์หรือการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อก็เหมือนกับหลักการพัฒนาทางกายภาพ physical พืชพรรณ โดยการตัด เมื่อตัดชิ้นส่วนของพืชแต่ละชิ้นจะเติบโตเป็นรายบุคคล มันเป็นเพียงวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อต้องคำนึงถึงความปลอดเชื้อของเครื่องมือและวัสดุ
ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ เซลล์หรือเนื้อเยื่อจะเติบโตเพื่อสร้างสิ่งมีชีวิตที่มีส่วนที่สมบูรณ์ การจัดหาสารอาหารและฮอร์โมนออกซินและไซโตไคนินในตัวกลางการเจริญเติบโตจะกระตุ้นการแบ่งตัวของเซลล์เพื่อให้การเจริญเติบโตเกิดขึ้น หากพืชได้รับบาดเจ็บ กรด Traumalin จะรักษาบาดแผล การให้ฮอร์โมนออกซินไปที่บาดแผลทำให้การแบ่งเซลล์เกิดขึ้นอย่างรวดเร็วและก่อตัวเป็นก้อนเนื้อละเอียดที่เรียกว่าแคลลัสที่ไม่แตกต่างกัน เซลล์แคลลัสเหล่านี้สามารถพัฒนาเป็นคนใหม่ได้ ด้วยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ทุกส่วนของพืชสามารถพัฒนาเป็นบุคคลใหม่ได้ (Solomon et al. 2005)
การก่อตัว Totipotency
เซลล์ Totipotent ที่เกิดขึ้นระหว่างระยะการสืบพันธุ์แบบอาศัยเพศและไม่อาศัยเพศ ได้แก่ สปอร์และไซโกต ไซโกตเป็นผลจากการรวมตัวของสองเซลล์สืบพันธุ์ ในสิ่งมีชีวิตบางชนิด เซลล์จะแยกความแตกต่างและสามารถกลับมามีศักยภาพใหม่ได้ ตัวอย่างเช่น การพัฒนาของมนุษย์เริ่มต้นขึ้นเมื่ออสุจิปฏิสนธิสร้างไข่และเซลล์ totipotent (ไซโกต) ในวันแรกหลังการปฏิสนธิ เซลล์เหล่านี้จะแบ่งออกเป็นเซลล์ totipotent ที่เหมือนกัน ประมาณสี่วันหลังจากการปฏิสนธิและหลังจากการแบ่งเซลล์หลายรอบ เซลล์เหล่านี้เริ่มที่จะพัฒนาอย่างเต็มความสามารถ ในพืช เซลล์เนื้อเยื่อที่จุดเจริญเติบโตก็มีความสามารถนี้เช่นกัน
เซลล์ Totipotent มีศักยภาพทั้งหมด พวกเขาสามารถเป็นเซลล์ pluripotent ผู้เชี่ยวชาญที่สามารถก่อให้เกิดเซลล์ลูกสาวจำนวนมาก แต่ไม่ใช่ทั้งหมดของเซลล์ที่จำเป็นสำหรับการพัฒนาของสิ่งมีชีวิต เซลล์ Pluripotent ได้รับความเชี่ยวชาญพิเศษมากขึ้นในเซลล์หลายศักยภาพที่พัฒนาเป็นเซลล์ที่มีหน้าที่เฉพาะ ตัวอย่างเช่น เซลล์ต้นกำเนิดจากเลือดหลายชนิดกลายเป็นเซลล์เม็ดเลือดแดง เซลล์สีขาว และเซลล์เม็ดเลือดในเกล็ดเลือด (เกล็ดเลือด)
ความสามารถของ totipotency สามารถเปลี่ยนแปลงได้โดยการเปลี่ยนสภาพแวดล้อมการดำรงชีวิต/การเจริญเติบโตของเซลล์ การเปลี่ยนแปลงของออสโมติก สารอาหาร ฮอร์โมน หรือแหล่งพลังงานที่สัมผัสกับเซลล์สามารถเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติเหล่านี้ได้ เป็น pluripotent (“หลายศักยภาพ”), multipotent (“หลายศักยภาพ”) หรือ unipotent (“ศักยภาพเดียว”) เซลล์ Pluripotent มีความสามารถในการเปลี่ยนแปลงจำนวนมาก multipotent เพียงไม่กี่และ Unipotent คือรูปแบบเซลล์ที่ระบุไว้
ความได้เปรียบ Totipotent
- อิสระในการกำหนดส่วนของพืชที่จะเพาะเลี้ยง
- เวลาที่ต้องการค่อนข้างสั้น
- ไม่ต้องการห้องขนาดใหญ่
- ผลิตพืชใหม่จำนวนมากจากพืชชนิดเดียวอย่างรวดเร็ว
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: คำจำกัดความของ Lymphatic Vesels ในชีววิทยา
วิธีการแยกเนื้อเยื่อพืช
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ/การเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง/การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเป็นเทคนิคในการแยกเซลล์ โปรโตปลาสซึม เนื้อเยื่อ และอวัยวะ และการเจริญเติบโตของส่วนต่างๆ เหล่านี้ด้วยสารอาหาร ซึ่งมีสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืชภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ เพื่อให้ชิ้นส่วนเหล่านี้สามารถสืบพันธุ์และงอกใหม่เป็นพืชที่สมบูรณ์แบบ กลับ. ในปี 1954 การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อได้รับความนิยมโดย Muer, Hildebrandt และ Riker
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อต้องใช้ความรู้พื้นฐานด้านเคมีและชีววิทยา หลักการเพาะเลี้ยงเซลล์หรือการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อก็เหมือนกับหลักการขยายพันธุ์โดยการตัดกิ่ง เมื่อตัดกิ่ง ชิ้นส่วนของพืชแต่ละชิ้นจะเติบโตเป็นรายใหม่ อย่างไรก็ตาม ในวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ เซลล์หรือเนื้อเยื่อจะเติบโตเพื่อสร้างสิ่งมีชีวิตที่มีส่วนที่สมบูรณ์ การจัดหาสารอาหารและฮอร์โมนการเจริญเติบโตออกซินและไซโตไคนินในตัวกลางการเจริญเติบโตจะกระตุ้นการแบ่งตัวของเซลล์เพื่อให้การเจริญเติบโตเกิดขึ้น หากพืชได้รับบาดเจ็บ กรด Traumalin จะรักษาบาดแผล
การให้ฮอร์โมนออกซินไปที่บาดแผลทำให้การแบ่งเซลล์เกิดขึ้นอย่างรวดเร็วและก่อตัวเป็นก้อนเนื้อละเอียดที่เรียกว่าแคลลัสที่ไม่แตกต่างกัน เซลล์แคลลัสเหล่านี้สามารถพัฒนาเป็นคนใหม่ได้ ปัจจุบันการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อได้รับการพัฒนาโดยการเพิ่มฮอร์โมนตามความจำเป็นสำหรับการสร้างอวัยวะพืชแต่ละส่วน ด้วยระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ทุกส่วนของร่างกายพืชสามารถพัฒนาเป็นพืชชนิดใหม่ได้
ซูเรียววิโนโต (1991) กล่าวว่า การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อในภาษาต่างประเทศเรียกว่า การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ วัฒนธรรม คือการเพาะปลูกและ เครือข่าย คือกลุ่มของเซลล์ที่มีรูปร่างและหน้าที่เหมือนกัน ดังนั้นการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อหมายถึงการปลูกเนื้อเยื่อพืชให้เป็นพืชขนาดเล็กที่มีคุณสมบัติเหมือนพ่อแม่
วิธีการแยกเนื้อเยื่อพืช เป็นวิธีการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชให้เป็นพืชขนาดเล็กที่มีคุณสมบัติเหมือนกับต้นพืช เทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อใช้คุณสมบัติของ totipotent พืช กล่าวคือความสามารถของเซลล์พืชแต่ละเซลล์ในการเจริญเติบโตและกลายเป็นพืชที่สมบูรณ์แบบหากอยู่ในสภาพแวดล้อมที่เหมาะสม เพื่อให้พืชสมบูรณ์แบบ เซลล์ต้องเติบโตบนสื่อพิเศษ ข้อกำหนดบางประการที่ต้องปฏิบัติตามเพื่อให้การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อประสบความสำเร็จ ได้แก่:
การคัดเลือกวัสดุจากพืชที่ดี (explants) มักจะนำมาจากเนื้อเยื่อเนื้อเยื่อ
- การใช้สื่อที่เหมาะสม สื่อนี้ต้องมีสารประกอบ 5 กลุ่ม ได้แก่ เกลืออนินทรีย์ แหล่งคาร์บอนของวิตามิน สารควบคุมร่างกาย และอาหารเสริมอินทรีย์
- บรรลุสภาวะปลอดเชื้อ คือ การนำวัสดุจากพืช (explants) ไปใช้ในลักษณะปลอดเชื้อ
- เครื่องปรับอากาศที่ดี
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: การทำความเข้าใจจุลชีววิทยาในชีววิทยาและปัจจัยและกลไกของมัน
หลักการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเป็นวิธีการแยกส่วนต่างๆ ของพืช เช่น โปรโตพลาสซึม กลุ่มเซลล์ เนื้อเยื่อ หรืออวัยวะ และ ปลูกภายใต้สภาวะปลอดเชื้อเพื่อให้ชิ้นส่วนสามารถสืบพันธุ์และงอกใหม่เป็นพืชที่สมบูรณ์ได้ กลับ. ทฤษฎีที่สนับสนุนเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อคือทฤษฎีเซลล์โดย Schawann และ Scheleiden (1838) ซึ่งระบุ totipotency (ศักยภาพทางพันธุกรรมทั้งหมด) ของเซลล์ กล่าวคือ เซลล์พืชที่มีชีวิตทุกเซลล์มีข้อมูลทางพันธุกรรมและเครื่องมือทางสรีรวิทยาที่สมบูรณ์ในการเติบโตและพัฒนาเป็นพืชทั้งต้นหากมีเงื่อนไข ที่สอดคล้องกัน
หลักการพื้นฐานของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเหมือนกับการปักชำ ร่างกายพืชแต่ละชิ้นจะกลายเป็นบุคคลใหม่ทั้งหมด (micropropagation) หากสภาพแวดล้อมเหมาะสมและมีสารอาหารเพียงพอ แต่ละส่วนของร่างกายของพืชจะสามารถเติบโตเป็นบุคคลจำนวนหนึ่งที่มีลักษณะเหมือนกับพ่อแม่ได้
พืชมีฮอร์โมนภายในที่สามารถกระตุ้นการเจริญเติบโตได้ เช่น ออกซินและไซโตไคนิน ฮอร์โมนนี้จะกระตุ้นการแบ่งเซลล์พืชเพื่อให้เกิดการเจริญเติบโต โดยการเพิ่มฮอร์โมนการเจริญเติบโต (ออกซิน) ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ เซลล์เนื้อเยื่อเหล่านี้จะแบ่งตัวเพื่อสร้างมวลของเซลล์แคลลัสที่ไม่แตกต่างกัน
ดิฟเฟอเรนติเอชั่น คือ จุดเริ่มต้นของกระบวนการสร้างอวัยวะ ซึ่งมีลักษณะเฉพาะโดยผลของการแบ่งเซลล์ต่างๆ สร้างรูปแบบต่อการก่อตัวของอวัยวะบางอย่างจากนั้นเซลล์แคลลัสจะเติบโตเป็นรายบุคคล ใหม่.
ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ขั้นตอนของการพัฒนาเซลล์โซมาติกเป็นตัวอ่อนจะเหมือนกับขั้นตอนของไซโกต ความแตกต่างคือไซโกต (2n) เกิดจากการแต่งงานของสเปิร์มเดี่ยวและไข่ การเจริญเติบโตของเอ็มบริโอนี้เริ่มจากเซลล์ > ทรงกลม > รูปหัวใจ > รูปร่างตอร์ปิโด > รูปใบเลี้ยง > ต้นอ่อน
ผลการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชเรียกว่าโคลน พืชชนิดใหม่เหล่านี้สามารถพัฒนาได้บนดินธรรมดาหรือบนพืชไร้ดิน ด้วยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ พืชจะได้รับการผลิตเป็นจำนวนมากโดยไม่มีพื้นที่ขนาดใหญ่ที่มีคุณภาพของพ่อแม่เพื่อตอบสนองความต้องการด้านอาหารของชุมชน
ปัจจุบันนี้ การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อไม่ได้ถูกนำมาใช้ในการขยายพันธุ์พืช แต่ใช้เป็น a เทคโนโลยีชีวภาพเพื่อให้ได้พืชที่ปราศจากไวรัส เพื่อการผลิตยา การผลิตพืชที่เหนือกว่าและ เป็นต้น
เทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ:
- การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อโดยใช้การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่ออ่อนหรือเนื้อเยื่ออ่อน
- การเพาะละอองเรณู/การเพาะอับละอองเกสร โดยใช้สารสกัดจากเกสรหรือเกสรตัวผู้
- การเพาะเลี้ยงโปรโตพลาสต์ โดยใช้สารสกัดจากโปรโตพลาสต์
- การเพาะเลี้ยงคลอโรพลาสต์ โดยใช้คลอโรพลาสต์เพื่อวัตถุประสงค์ในการหลอมโปรโตพลาสต์
- Somatic cross (หมายเลขโปรโตพลาสต์/โปรโตพลาสต์ฟิวชัน) ผสมข้ามโปรโตพลาสต์สองประเภท จากนั้นจึงปลูกให้กลายเป็นพืชขนาดเล็กที่มีลักษณะใหม่
ประโยชน์ของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
- การจัดหาเมล็ดพันธุ์ไม่ได้ขึ้นอยู่กับฤดูกาล
- กล้าไม้สามารถผลิตได้ในปริมาณมากในระยะเวลาอันสั้น (จากยอดหนึ่งที่ตอบสนองใน 1 ปี สามารถผลิตต้นกล้าขั้นต่ำ 10,000 ต้น/ต้นกล้าได้)
- เมล็ดที่ผลิตมีความสม่ำเสมอ
- เมล็ดที่ได้นั้นปลอดโรค (ใช้อวัยวะบางอย่าง)
- ค่าใช้จ่ายในการขนส่งเมล็ดพันธุ์ค่อนข้างถูกและง่าย
- อยู่ในขั้นตอนของเรือนเพาะชำปราศจากศัตรูพืช โรค และสิ่งแวดล้อมอื่นๆ
- สามารถรับคุณสมบัติที่ต้องการได้
- เมแทบอไลต์ทุติยภูมิจากพืชจะได้รับทันทีโดยไม่ต้องรอให้พืชโตเต็มที่
- เพื่อผลิตพืชใหม่จำนวนมากในระยะเวลาอันสั้นโดยมีคุณสมบัติและคุณภาพเหมือนกับต้นแม่
- รับพืชที่ปราศจากไวรัสและโรค
- การสร้างพันธุ์ใหม่ กล่าวคือ โดยการรวมพลาสมาจากเซลล์ต่าง ๆ ในสปีชีส์เดียว แล้วเติบโตผ่านการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ
- การอนุรักษ์พันธุ์พืชที่ใกล้สูญพันธุ์
- รักษาความถูกต้องของคุณสมบัติของพืช
ความได้เปรียบ วิธีการแยกเนื้อเยื่อพืช
- การจัดหาเมล็ดพันธุ์ไม่ได้ขึ้นอยู่กับฤดูกาล
- กล้าไม้สามารถผลิตได้ในปริมาณมากโดยใช้เวลาค่อนข้างเร็วกว่า (จากยอดหนึ่งที่ตอบสนองใน 1 ปี สามารถผลิตได้อย่างน้อย 10,000 เมล็ด)
- เมล็ดที่ผลิตมีความสม่ำเสมอ
- ไม่ต้องการพื้นที่ขนาดใหญ่
- เมล็ดที่ได้นั้นปลอดโรค (ใช้อวัยวะบางอย่าง)
- ค่าใช้จ่ายในการขนส่งเมล็ดพันธุ์ค่อนข้างถูกและง่าย
- เรือนเพาะชำปราศจากศัตรูพืช โรค และสิ่งแวดล้อมอื่นๆ
- สามารถรับคุณสมบัติที่ต้องการได้
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: ความเข้าใจและลักษณะของพืชใบเลี้ยงคู่พร้อมตัวอย่างที่สมบูรณ์
วิธีการแยกเนื้อเยื่อพืช แบบดั้งเดิม
การปลูกถ่ายอวัยวะ
การตอนกิ่งคือการปอกให้สะอาดและเอาแคมเบียมตามกิ่งหรือกิ่งยาว 5-10 ซม. จุดประสงค์ของการตอนกิ่งคือการขยายพันธุ์พืช พืชที่สามารถต่อกิ่งได้คือไม้ผลที่มีเนื้อแข็งหรือแคมเบียม ตัวอย่าง: มะม่วง ฝรั่ง ฝรั่งน้ำ ส้ม ฯลฯ เมื่อตอนกิ่งทิชชู่ต้องตัดเอาสารอาหารออกเพื่อให้สารอาหารที่เกิดจากการสังเคราะห์แสงหยุดในบริเวณที่ตัดและกระตุ้นการเจริญเติบโตของราก
วิธีการปลูกพืช
เครื่องมือและวัสดุปลูกถ่ายอวัยวะ
- รัดหรือใช้ต้นปาล์มชนิดหนึ่ง
- มีดคม
- ใยมะพร้าวหรือพลาสติก
- กรรไกร
- ดินที่อุดมสมบูรณ์
- กิ่ง/กิ่งที่เราจะต่อกิ่ง
ขั้นตอนการรับสินบน
- เลือกกิ่งหรือกิ่งที่ไม่แก่หรืออ่อนเกินไป
- เปลือกจนสะอาดกิ่งหรือกิ่งยาว 5-10 ซม.
- หั่นแคมเบียมให้สะอาด แล้วผึ่งลมออก
- คลุมด้วยดินแล้วห่อด้วยพลาสติกหรือใยมะพร้าว ผูกปลายทั้งสองข้างเหมือนห่อขนม ถ้าใช้พลาสติก ให้เจาะรูพลาสติกก่อน
- ให้ดินชุ่มชื้นด้วยการรดน้ำทุกวัน
- หลังจากรากงอกจำนวนมากแล้ว ให้ตัดกิ่งหรือกิ่งแล้วใส่ลงในหม้อ เมื่อดูดีแล้วให้ปลูกในดิน
ข้อดีของการปลูกถ่ายอวัยวะ:
- พืชให้ผลผลิตเร็วขึ้น (ผลไม้)
- ลักษณะของพืชใหม่จะเหมือนกับต้นแม่
- ให้ผลในเวลาอันสั้น ± 4 ปี
- ระยะเวลาที่ใช้ในการขยายพันธุ์ค่อนข้างสั้นระหว่าง 1-3 เดือน
ข้อเสียของการปลูกถ่ายอวัยวะ:
- พืชจากการต่อกิ่งจะมีรากที่มีเส้นใยเท่านั้น ดังนั้นจึงล้มง่ายกว่าการปลูกจากเมล็ด
- อายุพืชสั้นกว่าพืชที่ปลูกจากเมล็ด
- รูปร่างของต้นแม่ได้รับความเสียหาย
- ไม่สามารถให้เมล็ดได้ค่อนข้างมากในเวลาที่รวดเร็ว
- วิธีการทำงานค่อนข้างซับซ้อนและต้องใช้ความอดทน
- หากปลูกต้นแม่บ่อยๆ ผลผลิตของแม่จะหยุดชะงัก
แตะ
การสืบพันธุ์โดยการตัด (ตัด) เป็นวิธีที่ง่ายที่สุดที่จะทำ เช่นเดียวกับการปลูกถ่ายอวัยวะ จากการขยายพันธุ์โดยการตัด ได้พืชใหม่ที่มีคุณสมบัติเหมือนพ่อแม่ คุณสมบัติเหล่านี้ได้แก่ ต้านทานโรค รสผลไม้ สีสันและความสวยงามของดอกไม้ เป็นต้น แต่เมื่อเทียบกับการตอนกิ่ง การปักชำก็มีข้อดี หากการต่อกิ่งต้องการความช่วยเหลือจากต้นแม่ในการปลูกรากจนสามารถยืนได้ด้วยตัวเอง แต่การปักชำไม่เป็นเช่นนั้น การปักชำตามเงื่อนไขจะงอกรากและใบให้กลายเป็นพืชที่สมบูรณ์และสามารถผลิตดอกและผลได้
การปักชำต่างๆ
- การปักชำราก ได้แก่ การปักชำประกอบด้วยชิ้นส่วนของรากที่มีชีวิตด้วยตาเดียวหรือหลายตา ตัวอย่างเช่น การตัดกิ่งขิงและต้นขมิ้น
- การตัดลำต้น การตัดเหล่านี้ประกอบด้วย:
- กิ่งที่ตัดกิ่งซึ่งประกอบด้วยลำต้นหรือกิ่งหรือกิ่งเก่าที่ไม่มีเปลือกสีเขียวอีกต่อไป
ตัวอย่างเช่น การตัดมันสำปะหลัง - การปักชำกิ่ง ได้แก่ กิ่งที่มาจากลำต้นหรือกิ่งที่ยังอ่อนที่ยังอ่อนอยู่ซึ่งยังมีเปลือกสีเขียว ตัวอย่างเช่น การตัดบนต้นพรุนสีเหลืองและชา
- ปลายกิ่ง คือ กิ่งที่ใช้ปลายกิ่งที่อายุน้อยที่สุด
เช่น การปักชำบนต้นคะน้า
- การปักชำใบ คือ การปักชำที่ใช้ส่วนของพืชในลักษณะของใบด้วยตาข้างเดียวหรือหลายตา ตาแต่ละข้างจะสร้างยอดและรากใหม่ เมื่อต้นใหม่โตขึ้น วัสดุตัดจะค่อยๆเน่า
- การปักชำหน่อ / ตา คือ การขยายพันธุ์พืชโดยใช้ดอกตูม เช่น ในการปักชำต้นอ้อย
แต่ที่ดีที่สุดคือการตัดโดยใช้โคนของลำต้น เพราะรากที่เกิดขึ้นนั้นมีมากมายและแข็งแรงกว่า นอกจากนี้ ถ้ามันเติบโตใหญ่ พืชทางกายภาพก็จะแข็งแรงขึ้นและไม่ยุบง่าย ส่วนโคนของลำต้นนั้นดีมากสำหรับการตัดกิ่งเพราะมีโอกาสทำให้ยอดงอกเพิ่มขึ้น
ตัวอย่างวิธีการตัดต้นไม้ เช่น บนดอกกุหลาบ:
- ตัดกิ่ง/ก้านกุหลาบเก่า. หากยาวเกินไป ให้ตัดก้านเป็นชิ้นขนาด 4-5 ซม. ด้วยมีดที่คมและสะอาด
- สื่อปลูกเป็นดินบริสุทธิ์ไม่มีส่วนผสมของปุ๋ยชนิดใด อย่าใช้ปุ๋ยเพราะมีแบคทีเรียจำนวนมากที่สามารถยับยั้งหรือฆ่าพืชที่จะตัดได้ ในกระบวนการตัดกิ่ง สิ่งที่พืชต้องการคือการเจริญเติบโตของราก
- ในขั้นตอนการปลูก ให้ใส่ดินลงในถุงพลาสติกขนาดสี่กก. เจาะรูด้วยไม้กวาด โดยเฉพาะก้น แล้วล้างด้วยน้ำสะอาดจนเนียน หลังจากนั้นเสียบก้านกุหลาบที่ตัดก่อนหน้านี้ 4-5 ซม. ตรงกลางหม้อ/ภาชนะ โดยให้ความชื้นครึ่งหนึ่งของอาหารปลูก
- สามารถวางทรีตเมนต์ในที่ร่มและให้สื่อที่กำลังเติบโตชื้นและเปียก อย่าใส่ปุ๋ยจนกว่าพืชจะพร้อมที่จะย้าย
- หลังจากที่พืชเติบโตและมีก้านใบมากกว่าสามก้าน หมายความว่าพืชพร้อมที่จะย้ายไปยังสื่อปลูกใหม่
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: ความหมาย ลักษณะ และชนิดของพืชที่ไม่ใช่หลอดเลือด (Bryophyta) และตัวอย่างที่สมบูรณ์ Contohnya
ติด (กราฟต์)
การติดหรือการต่อกิ่งทำได้โดยติดตากับพืชชนิดอื่น โดยพื้นฐานแล้ว การเกาะติดเกือบจะเหมือนกับการเชื่อมต่อ พืชที่ต่อกิ่งมักจะมีข้อดีของตัวเอง ตัวอย่างเช่น พืชที่มีรากที่แข็งแรงแต่ผลขนาดเล็กหรือเปรี้ยวสามารถนำมารวมกับพืชที่มีผลขนาดใหญ่และให้ผลหวานแต่มีรากที่อ่อนแอ
วิธีการต่อกิ่งพืช เครื่องมือและวัสดุ:
- ต้นปาล์มชนิดหนึ่ง, มีด/เครื่องตัด,
- พืชสองประเภท (ต้นตอและกิ่ง)
ขั้นตอนการรับสินบน
- เตรียมต้นตออายุของพืชขึ้นอยู่กับชนิดของพืชที่จะต่อกิ่ง
- เตรียมหน่อในรูปของเปลือกและหน่อจากต้นแม่ที่มีคุณภาพดีและมีคุณสมบัติที่เหนือกว่า
- ฝานและตัดต้นตอยาว 2-3 ซม. กว้าง 1-1.5 ซม.
- ใส่ตาเข้าไปในชิ้นที่ทำมาจากต้นตอ ทำอย่างรวดเร็ว อย่าปล่อยให้แผลแห้ง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าไม่มีช่องว่างระหว่างบาดแผลกับตา
- มัดแผ่นด้วยเชือกราฟเฟีย โดยให้ทิศทางการมัดจากล่างขึ้นบน ให้เชือกเรียงตัวแน่นเหมือนกระเบื้อง และไม่มีช่องว่าง ยกเว้นดอกตูม
- หลังจาก 2 สัปดาห์ ให้ดูที่ตา หากเป็นสีเขียวอมแดงหรือดำ แสดงว่าการปลูกถ่ายอวัยวะล้มเหลว ในขณะเดียวกัน ถ้าสียังเป็นสีเขียวสดและติดอยู่ที่ก้านหลัก แสดงว่าการตอนกิ่งสำเร็จและสามารถถอดพันธะออกได้ เวลาในการผูกมัดอาจนานถึง 3 สัปดาห์
- เมื่อแน่ใจว่าผ้าปิดตายังมีชีวิตอยู่ ให้ตัดก้านที่อยู่เหนือผ้าปิดตาทันที เป้าหมายคือแหล่งอาหารจะโฟกัสไปที่ยอดจากแผ่นแปะ มิฉะนั้นแพทช์จะตาย ความยาวของก้านและระยะการตัดจากแผ่นปิดตาจะแตกต่างกันไปตามชนิดของพืชที่ต่อกิ่ง
เป็ดลง
การเป็ดเป็นวิธีการขยายพันธุ์พืชโดยการลดกิ่งหรือลำต้นของพืชลงบนพื้น ส่วนที่ฝังไว้จะนำรากออก นอกจากนี้ยังสามารถแยกดินแดนและพัฒนาต่อไปได้
วิธีการทำการขยายพันธุ์ Ducking:
- เลือกกิ่งที่แก่ แข็งแรง และยาว
- ทำความสะอาดกิ่งกลางของพืชจากใบและสิ่งสกปรกที่เกาะติด
- งอกิ่งลงไปที่พื้นจนศูนย์กลางของกิ่งสัมผัสกับพื้นเล็กน้อย sedikit
- ฝังกิ่งก้านของพืชโดยใช้ดิน
- ทิ้งไว้สองสามวันขณะรดน้ำเนินดิน
- หลังจากที่รากจากจุดศูนย์กลางของกิ่งปรากฏขึ้น ให้แยกต้นใหม่ออกจากต้นแม่โดยการตัดกิ่งออกจากลำต้นหลัก
- ต้นใหม่พร้อมย้ายลงสื่อปลูก
เชื่อมต่อ/Enten
การเชื่อมต่อหรือการเชื่อมต่อมีจุดมุ่งหมายเพื่อรวมคุณลักษณะที่เหนือกว่าสองประการของบุคคลที่แตกต่างกัน ตัวอย่างเช่น เพื่อรองรับพืช จำเป็นต้องมีพืชที่มีรากที่แข็งแรง ในขณะเดียวกันเพื่อผลิตผลหรือใบหรือดอกที่พืชต้องการผลผลิตสูง พืชที่ได้จะมีรากที่แข็งแรงและให้ผลผลิตสูง ตัวอย่างพืชที่สามารถเชื่อมต่อได้คือพืชที่อยู่ในตระกูล ตัวอย่างเช่น มะเขือเทศกับมะเขือยาว
วิธีการปลูกพืช เครื่องมือและวัสดุ
- มีด/เครื่องตัดหมัน
- เชือกต้นปาล์มชนิดหนึ่ง
- พืชสองประเภท (มะเขือยาวและมะเขือเทศ)
วิธีเชื่อมต่อพืช:
- เลือกพืชสำหรับต้นตอและกิ่งที่แข็งแรง ต้นตอมีเส้นผ่านศูนย์กลางใหญ่กว่ากิ่ง
- ใช้มีดที่คมและปลอดเชื้อเพื่อตัดต้นตอให้เป็นรูปตัววี แล้วตัดกิ่งให้เป็นรูปตัววีที่ดีที่สุด ความยาวของกิ่งคือ 3-8 ซม.
- ใส่กิ่งลงในร่องของต้นตอ จากนั้นยึดข้อต่อด้วยเทปปิดผนึกหรือพลาสติกใสชิ้นหนึ่ง (จากถุงพลาสติกใส่น้ำตาลทราย) ตรวจสอบให้แน่ใจว่าการเชื่อมต่อไม่ได้ถูกน้ำ
- เพื่อลดการระเหยและเร่งการเจริญเติบโตของยอดให้ทิ้งใบไว้ด้านบน 2-4 ใบ แล้วผ่าครึ่งหรือเล็มใบทั้งหมด
- ห่อก้านที่ต่อกันแล้วในถุงพลาสติกแล้ววางในที่ร่มประมาณ 7-10 วัน
- ในช่วงเวลานั้นจะเห็นการงอกของยอดใบ เปิดถุงพลาสติก และนำไปตากแดด
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: เฟิร์น – ความหมาย ลักษณะ ลักษณะ โครงสร้าง การจำแนก ตัวอย่าง
ตัวอย่าง
พืชหายาก
อินโดนีเซียเป็นประเทศที่มีป่าเขตร้อนที่ใหญ่มาก ระบบนิเวศของสัตว์และพืชมีมากมาย นอกจากนี้ ปัจจุบันสัตว์หลายชนิดกำลังถูกล่าเพื่อการค้า เช่นเดียวกับพืชที่โค่นล้มและซื้อขายแลกเปลี่ยน ดังนั้นสัตว์และพืชหลายชนิดจึงหายาก หายาก หมายความว่าประชากรอาศัยอยู่น้อยมากในโลกที่จะถูกคุกคามด้วยการสูญพันธุ์
ดังนั้นเราต้องรักษาจำนวนประชากรของสัตว์และพืชที่เกือบจะสูญพันธุ์ โดยไม่ได้ตัดต้นไม้อย่างผิดกฎหมาย รุกล้ำ และอื่นๆ อีกมากมาย ต่อไปนี้เป็นพืชหายากบางชนิดที่ปลูกในอินโดนีเซีย
อ่านบทความที่อาจเกี่ยวข้องด้วย: พืชใบเลี้ยงเดี่ยว – ความหมาย กลุ่ม ลักษณะ โครงสร้าง ตัวอย่าง
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชหายาก (กล้วยไม้)
ในการขยายพันธุ์กล้วยไม้ เทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อมีเป้าหมายเพื่อผลิตดอกไม้ในปริมาณมากและสม่ำเสมอ ทำได้โดยการปลูกเนื้อเยื่อพืช (ราก ใบ ลำต้น ยอด) หรือการเจริญเติบโต เนื้อเยื่อกำเนิด (ออวุล เอ็มบริโอ และเมล็ดพืช) บนสื่อประดิษฐ์ในรูปของของเหลวหรือของแข็งอิสระ จุลินทรีย์ กิจกรรมนี้ดำเนินการในห้องปลอดเชื้อโดยใช้อุปกรณ์ฆ่าเชื้อ ขั้นตอนการขยายพันธุ์กล้วยไม้ด้วยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ได้แก่
- การเลือกคำอธิบาย
สิ่งสกัดคือเซลล์หรือชิ้นส่วนของเนื้อเยื่อพืชที่วางไว้และบำรุงรักษาในสื่อที่เป็นของแข็งหรือของเหลวที่เหมาะสมและภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ ด้วยวิธีนี้เซลล์บางส่วนบนพื้นผิวของชิ้นจะขยายและก่อตัวเป็นแคลลัส เมื่อแคลลัสที่ก่อตัวขึ้นถูกถ่ายโอนไปยังตัวกลางสร้างความแตกต่างที่เหมาะสม พืชขนาดเล็กที่สมบูรณ์จะถูกสร้างขึ้นและเรียกว่าต้นอ่อน ด้วยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อนี้ เนื้อเยื่อพืชเพียงชิ้นเดียวสามารถผลิตแคลลัสซึ่งสามารถกลายเป็นต้นอ่อนได้เป็นจำนวนมาก
แม้ว่าโดยหลักการแล้วเซลล์ทุกชนิดสามารถเจริญเติบโตได้ แต่ควรเลือกส่วนของพืชที่ยังมีชีวิตอยู่ อ่อนและเติบโตง่าย คือ ส่วนของเนื้อเยื่อ เช่น ใบอ่อน ปลายราก ปลายก้าน ชิปเมล็ดและ เป็นต้น
- การสร้างสื่อ
สื่อเป็นปัจจัยกำหนดในการเผยแพร่วัฒนธรรมเครือข่ายส่วนใหญ่ องค์ประกอบของสื่อที่ใช้ขึ้นอยู่กับชนิดของพืชที่จะขยายพันธุ์ สื่อที่ใช้มักประกอบด้วยเกลือแร่ วิตามิน และฮอร์โมน นอกจากนี้ยังต้องการส่วนผสมเพิ่มเติม เช่น วุ้น น้ำตาล และอื่นๆ สารควบคุมการเจริญเติบโต (ฮอร์โมน) ที่เพิ่มเข้ามาก็แตกต่างกันไปทั้งในรูปแบบและปริมาณขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สื่อการเจริญเติบโตสามารถอยู่ในรูปของสารละลาย (ของเหลว) หรือของแข็ง ตัวกลางที่เป็นของเหลวหมายถึงของผสมของสารเคมีกับน้ำกลั่น ในขณะที่ตัวกลางที่เป็นของแข็งคือตัวกลางที่เป็นของเหลวที่เติมด้วยสารทำให้แข็งตัวของวุ้น
สื่อที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อกล้วยไม้ไม่แตกต่างจากสื่ออื่นมากนัก ก่อนสร้างสื่อ เราต้องกำหนดก่อนว่าเราจะสร้างสื่ออะไร ชนิดของอาหารที่มีองค์ประกอบทางเคมีต่างกันสามารถนำมาใช้สำหรับอาหารเลี้ยงเชื้อจากเนื้อเยื่อพืชต่างๆ ตัวอย่างเช่น สื่อ Vacin Went ดีมากสำหรับสื่อปลูกกล้วยไม้ แต่ไม่เหมาะกับสื่อปลูกอื่นๆ ในการทำสื่อเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ เป็นเรื่องปกติที่จะชั่งน้ำหนักแต่ละองค์ประกอบของสารเคมีที่มีอยู่ในสูตรอาหารพื้นฐาน ขั้นตอนนี้ใช้ไม่ได้ผลเนื่องจากใช้เวลานานและลดความแม่นยำ นอกจากนี้ ในบางครั้ง เครื่องชั่งที่ใช้ชั่งน้ำหนักสารเคมีจำนวนเล็กน้อยก็ไม่มีให้ใช้ในบางครั้ง
สื่อสำเร็จรูปวางในหลอดทดลองหรือขวดแก้ว สื่อที่ใช้ต้องผ่านการฆ่าเชื้อด้วยความร้อนในหม้อนึ่งความดัน
- การเริ่มต้น
การเริ่มต้นคือการนำเอาพืชจากส่วนต่างๆ ของพืชมาเพาะเลี้ยง ส่วนของพืชที่มักใช้ในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อคือหน่อ
- การทำหมัน
การทำหมันคือกิจกรรมทั้งหมดในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อจะต้องดำเนินการในที่ปลอดเชื้อ กล่าวคือใน ไหลลื่น และใช้อุปกรณ์ปลอดเชื้อ การทำหมันในอุปกรณ์คือการใช้เอทานอลที่ฉีดพ่นอย่างสม่ำเสมอบนอุปกรณ์ที่ใช้ ช่างเทคนิคที่ทำวิธีการแยกเนื้อเยื่อพืชควรเป็นหมัน
การคูณ
การคูณเป็นกิจกรรมของการคูณพืชที่คาดหวังโดยการปลูกพืชอธิบายบนสื่อ กิจกรรมนี้ดำเนินการใน ไหลลื่น เพื่อหลีกเลี่ยงสิ่งปนเปื้อนที่ทำให้เกิดความล้มเหลวในการเจริญเติบโต หลอดทดลองที่ฝังด้วย explants จะถูกวางบนชั้นวางและวางไว้ในที่ปลอดเชื้อที่อุณหภูมิห้อง
- รูต
การรูตเป็นระยะที่สิ่งที่สกัดออกมาจะแสดงการเติบโตของราก ซึ่งบ่งชี้ว่ากระบวนการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเริ่มทำงานได้ดี มีการสังเกตทุกวันเพื่อดูการเจริญเติบโตและการพัฒนาของราก และเพื่อดูการปนเปื้อนของแบคทีเรียหรือเชื้อรา สารปนเปื้อนจะแสดงอาการต่างๆ เช่น สีขาวหรือสีน้ำเงิน (เกิดจากเชื้อรา) หรือเน่าเสีย (เกิดจากแบคทีเรีย)
- เคยชินกับสภาพ
เคยชินกับสภาพเป็นกิจกรรมของการย้าย explants ออกจากห้องปลอดเชื้อไปที่เตียง การถ่ายโอนจะดำเนินการอย่างระมัดระวังและค่อยเป็นค่อยไป กล่าวคือ โดยการจัดหาหน้ากาก ฮูดใช้ปกป้องเมล็ดจากอากาศภายนอกและแมลงศัตรูพืชและโรคต่างๆ เนื่องจากเมล็ดจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อมีความอ่อนไหวต่อแมลงศัตรูพืชและอากาศภายนอกเป็นอย่างมาก หลังจากที่ต้นกล้าสามารถปรับให้เข้ากับสภาพแวดล้อมใหม่ได้ ฮูดจะค่อยๆ ถูกถอดออก และดำเนินการบำรุงรักษาต้นกล้าในลักษณะเดียวกับการบำรุงรักษาต้นกล้ารุ่นกำเนิด